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Don Rodrigo, fait régner la terreur sur la Lombardie. Il s'oppose à l'union de Renzo et Lucia, qui fuient le village, conseillés par le frère Cristoforo.
Le comte Zio et le Père provincial affrontent le frère Cristoforo qui leur fait peur et s'en va. Renzo, séparé de Lucia, erre et tente vainement une approche avec Agnese.
Don Rodrigo fait un rêve de pestiféré où il est poursuivi par les braves qui veulent le pousser chez Lucia. Il se réfugie chez frère Cristoforo, occupé à une homélie apocalyptique. Renzo et Lucia se retrouvent et assistent à la mort de fra Cristoforo. Ils semblent se diriger sur la voie de l'union définitive mais Lucia déclare qu'elle ne veut plus se marier. Don Rodrigo, en route vers son palais, meurt, atteint de la peste.
