Issue d'une famille d'artistes, Daisy Von Scherler Mayer est la petite-fille du scénariste Edwin Justus Mayer et la fille de l'actrice Sasha Von Scherler et de l'écrivain Paul Avila Mayer, créateur de la série télévisée Ryan's hope. Elle fréquente très tôt le milieu du théâtre et travaille au cours de son adolescence pour le Festival Shakespeare de New York. Après avoir été diplômée de théâtre et d'histoire à la Wesleyan University, elle monte des versions contemporaines de classiques comme La Tempête ou Les Deux gentilshommes de Vérone.

En 1995, Daisy Von Scherler Mayer réalise son premier long métrage intitulé Party girl. Ecrite en collaboration avec Harry Birckmayer, cette comédie, dont le succès donnera naissance à une série Fox, est interprétée par Parker Posey. Dans le même registre, elle dirige Jada Pinkett Smith en croqueuse d'hommes dans Woo (1998), puis écrit et met en scène, la même année, Madeline, adapté du classique de Ludwig Bemelmans. En 2002, Shekhar Kapur produit son quatrième film, Le Gourou et les femmes, dans lequel un jeune Indien (Jimi Mistry), professeur de danse, s'installe aux Etats-Unis et devient un gourou enseignant la spiritualité à travers le sexe.