Né en 1946 à Seattle, John Aylward suit des études d'art dramatique à l'Université de Washington. Acteur de télévision pendant plus de 30 ans, il multiplie les petits rôles dans de célèbres séries américaines.

Outre le rôle du chirurgien Donald Anspaugh, récurrent dans Urgences, et celui du conseiller Barry Goodwin dans A la Maison Blanche, il est également apparu brièvement dans Alias, Ally McBeal, X-Files, Nip/Tuck, New York Police Judiciaire, Mad Men, Mentalist ou encore Fringe.

Plus récemment, on a pu le voir au casting de Yellowstone, dans le rôle du Père Bob.

Sur grand écran, John Aylward collectionne également les seconds rôles, dans des longs métrages aussi divers que Les Tortues Ninja 3, Armageddon, Les Visiteurs en Amérique, De l'eau pour les éléphants, Gangster Squad ou Albert à l'ouest.