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Sarah Clarke découvre la comédie durant l'année d'études qu'elle passe à Bologne (Italie). De retour aux États-Unis, elle profite de cours d'art dramatique lorsqu'elle prend des photos pour un centre d'arts culturels à St. Louis. Elle s'installe ensuite à New York pour étudier sa nouvelle passion, et fait ses débuts en 2000 dans le court-métrage Pas de deux, puis dans une publicité pour Volkswagen. Après un passage par la série Sex & the City, elle rejoint le casting de 24 heures chrono (2001), où elle incarne la terroriste Nina Myers. En 2005, elle consulte le Dr. House et obtient un rôle récurrent dans la 3ème saison de Las Vegas.
Sur le grand écran, elle apparaît dans Thirteen (2003), puis aux côtés de Lisa Kudrow dans Happy Endings (2005). En 2008, l'actrice retrouve la réalisatrice Catherine Hardwicke, qui l'avait déjà dirigée dans Thirteen, pour jouer la mère de Bella Swan (Kristen Stewart) dans Twilight - Chapitre 1 : fascination, rôle qu'elle endosse à nouveau deux ans plus tard dans Twilight - Chapitre 3 : hésitation, le troisième volet de la célèbre saga vampirique.
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