Stefano Cassetti est un acteur français d'origine italienne qui est venu au cinéma par hasard. Auparavant informaticien, c'est grâce à une rencontre dans un restaurant avec le directeur du casting de Roberto Succo qu'il tourne son premier film. Troublé par cet Italien au regard bleu acier et "la violence retenue qui émane de lui", le réalisateur Cédric Kahn décide d'engager ce non professionnel et lui confie le rôle du tueur Roberto Succo. Son choix s'avère judicieux car l'interprétation de Stefano Casetti étonne tout le monde et lui rapporte une nomination pour le César du meilleur espoir masculin en 2002.

En 2003, Louis-Pascal Couvelaire lui offre l’opportunité de continuer à faire du cinéma en lui confiant le rôle du pilote Giulio Cavallo dans le film Michel Vaillant. Après de petits rôles dans des films italiens, le comédien joue Vittorio dans Poltergay de Eric Lavaine avant d'apparaitre à la télévision dans des séries comme La commune et Rien dans les poches. Il revient en 2008, dans le road-movie Cowboy Angels de Kim Massee, dans lequel il interprète le rôle de Luigi puis en tant que prêtre dans Un poison violent de Katell Quillévéré.