Après le Conservatoire où elle suit les cours de Raymond Girard, Nicole Calfan entre à la Comédie-Française où elle reste six ans jusqu'en 1968. La même année, elle apparaît pour la première au cinéma dans Le Grand amour de Pierre Etaix, puis dans Borsalino de Jacques Deray (1969). Elle se fait une spécialité des personnages de jeunes filles légères dans les films de Jean Yanne, et de petites amies de voyous dans des polars (Le Casse d'Henri Verneuil, 1970; Le Gang à nouveau de Jacques Deray, 1976).
La comédienne fait une incursion internationale avec le rôle de Kitty dans Les Trois Mousquetaires (1972) et la suite On l'appelait Milady (1974). En retrait dans les années 80 et 90, Nicole Calfan fait un retour remarqué en belle-mère bourgeoise dans La Vérite si je mens ! 2 de Thomas Gilou (2001) et interprète la femme délaissée de François Berléand dans Une employée modèle de Jacques Otmezguine (2003).
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