Elevé dans une culture catholique et militaire stricte, le jeune John Cameron Mitchell s'émancipe très vite au contact de l'écriture et de la comédie. Du milieu des années 80 jusqu'au début des années 2000, il multiplie les petites apparitions à l'écran tout en griffonnant des pages de scénarios qu'il rêve de voir transposer sur pellicule.

Ne faisant pas mystère de son homosexualité et sa fascination pour les choses du sexe en général, John Cameron Mitchell se révèle en 2001 avec le déjanté Hedwig and the Angry Inch, long métrage qu'il réalise, écrit et dont il tient le rôle principal. Primé à Sundance, Grand Prix du Jury à Deauville, le film impose une personnalité hors du commun qui mettra alors cinq longues années à confirmer. Après avoir produit l'ovni Tarnation en 2004 et mis en scène des vidéo-clips pour les Bright Eyes ou les Scissor Sisters, John Cameron Mitchell signe son grand retour cinématographique en 2006 avec le sulfureux Shortbus, comédie qui traite du sexe de manière drôle, intelligente et émouvante.