Roland Bertin suit les cours Alick-Roussel de 1950 à 1952 avant de travailler à la radio comme réalisateur et comédien. Il construit une solide carrière dramatique en jouant beaucoup dans le théâtre subventionné, puis en entrant à la Comédie-Française en 1982.

Roland Bertin commence à percer à la télévision et au cinéma à partir des années 70. Au départ, il se contente de faire des apparitions (Stavisky d'Alain Resnais, 1974), puis enchaîne une multitude de seconds rôles sous la direction de metteurs en scène prestigieux comme Costa-Gavras (Section spéciale, 1975), Joseph Losey (Monsieur Klein, 1976) ou encore Barbet Schroeder (Maîtresse, 1976).

Les années 80 sont l'occasion pour Roland Bertin d'aborder des personnages plus étoffés. En prolongement de leur collaboration théâtrale, Patrice Chéreau offre plusieurs rôles à Roland Bertin dont celui de Boesman dans L' Homme blessé (1983). Le comédien joue également des personnages d'importance dans Louise l'insoumise de Charlotte Silvera (1985), Corps et Biens de Benoît Jacquot (1986) et Cyrano de Bergerac de Jean-Paul Rappeneau (1990).

Le comédien apparaît ensuite aux génériques de La Fille de l'air (1992), des Filles, personne s'en méfie (2003) et d'Olé ! (2005). Il collabore également à deux reprises avec Albert Dupontel, sur Bernie (1996) et Enfermés dehors (2006).